㈠ 为什么酶反应要控制好反应时间
酶有最适温度，温度过高会使酶失活，破坏酶蛋白结构。给采纳！谢谢
㈡ 化学 酶反应时间为什么要严格控制酶反应温度为什么要严格控制为60℃
生物中酶有两种，一种为蛋白质酶，一种为RNA酶
而化学中的酶主要为蛋白质，或可见化学书中已默认为蛋白质，（这个不用纠结，学什么用什么）
且蛋白质在高温，过酸过碱的情况下都会破坏其结构，使其变性失活，（低温只会抑制其活性，不会改变其化学结构，要注意），所以使用时务必注意。
当然，酶有一个最适温度，在该温度左右，酶的催化功能最强，该温度你自己看着办。
㈢ 在测定酶活力时,为什么对试剂配置、实际用量、血清用量、温度、PH、作用时间均需严格控制
谷物种子萌发时淀粉酶活力的测定
几乎所有植物中都存在淀粉酶，尤其是萌发的禾谷类种子，淀粉酶活性最强。主要是α-淀粉酶和β-淀粉酶。种子萌发时，淀粉酶活性随萌发时间迅速增加，将淀粉分解成小分子糖类，供幼苗生长。α-淀粉酶随机水解淀粉的α-1，4-糖苷键，作为淀粉分解的起始酶而起主要作用；其水解产物为麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原性糖；β-淀粉酶水解非还原端的第二个α-1，4-糖苷键，水解产物为麦芽糖，并能使一部分糊精糖化。本实验以萌发种子为材料，测定其中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的差异。
【原理】
两种淀粉酶具有不同理化特性，α-淀粉酶不耐酸，在PH3�6以下迅速钝化；β-淀粉酶不耐热，在70℃下15Min则被钝化。据此，在测定时钝化其中之一，就可以测定出另一种酶的活力，本实验采用加热钝化β-淀粉酶测出α-淀粉酶活力，再与非钝化条件下测得的总淀粉酶活力比较，求出β-淀粉酶活力。淀粉的水解产物麦芽糖及其他还原性糖能与3，5-二硝基水杨酸试剂反应，使其还原生成红色3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内，其颜色深浅与淀粉酶水解产物的浓度成正比，可用麦芽糖(或葡萄糖)浓度表示，用比色法测定淀粉生成的还原糖的量，以单位重量样品在一定时间内生成的麦芽糖的量表示酶活力。
【仪器与用具】
分光光度计；离心机；恒温水浴器；研钵；具塞刻度试管25Ml 13支，刻度吸管1ml、2ml、5Ml各1支；容量瓶50Ml 2支。
【试剂】
麦芽糖标准液(1Mg／Ml)：称取100Mg麦芽糖，用蒸馏水溶解并定容至100Ml。
DNS试剂(3，5-二硝基水杨酸)：精确称取3，5-二硝基水杨酸1g，溶于20Ml 12Mol／L NAOH溶液中，加入50Ml蒸馏水，再加入30g酒石酸钾钠，待溶解后用蒸馏水定容至100Ml。盖紧瓶塞，勿使CO2进入。若溶液混浊，可过滤后使用。
0�1Mol／L PH5�6的柠檬酸缓冲液：A液(0�1Mol／L柠檬酸)：称取分析纯柠檬酸21�01g，用蒸馏水溶解并定容至1L；B液（0�1Mol／L柠檬酸钠）：称取柠檬酸钠29�41g用蒸馏水溶解并定容至1L；取A液55Ml与B液145Ml混匀，即为0�1Mol／L PH5�6的柠檬酸缓冲液。
1％淀粉溶液：称取1g淀粉溶于100Ml 0�1Mol／L PH5�6的柠檬酸缓冲液中。
【方法】
1.酶液提取称取25℃下萌发3～4天的小麦种子1�0g(芽长1�0～1�5CM)，置研钵中，加少量石英砂和2Ml蒸馏水，研磨成匀浆后转入离心管中，用7Ml蒸馏水分次将残渣洗入离心管，提取液在室温下放置提取15～20Min，每隔数分钟搅动1次，使其充分提取。然后在3000r／Min转速下离心10Min，将上清液倒入50Ml容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度，摇匀，即为淀粉酶原液。吸取上述淀粉酶原液5Ml，放入50Ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度摇匀，即为淀粉酶稀释液。
2�麦芽糖标准曲线制作取7支干净的具塞刻度试管，编号，按表18-1加入试剂：
表18-1制作麦芽糖标准曲线配方表
试剂管号1234567麦芽糖标准液（ml)00.20.40.81.21.62.0蒸馏水（ml)2.01.81.61.20.80.40麦芽糖含量（mg)00.20.40.81.21.62.03,5-二硝基水杨酸（ml)2222222摇匀，置沸水浴中煮沸5Min。取出后流水冷却，加蒸馏水定容至20Ml。以1号管作为空白调零点，在540nM波长下比色测定。以麦芽糖含量为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
3�酶活力的测定取6支干净的具塞刻度试管，编号，按表18-2进行操作。
表18-2酶活力的测定配方表
操作项目管号Ⅰ-1Ⅰ-2Ⅰ-3Ⅱ-1Ⅱ-2Ⅱ-3淀粉酶原液（ml)1.01.01.0000钝化β-淀粉酶置70℃水浴中15Min,取出后在流水中冷却淀粉酶稀释液（ml)000111DNS试剂（ml)2.0002.000预保温40℃恒温水浴中保温10Min1%淀粉溶液（ml)(40℃)1.01.01.01.01.01.0保温40℃恒温水浴中准确保温5MinDNS试剂（ml)02.02.002.02.0摇匀，置沸水浴中5Min，取出后冷却，加蒸馏水至20Ml，摇匀，在540nM波长下比色，记录测定结果。
4�结果计算 用Ⅰ-2、Ⅰ-3吸光度平均值与Ⅰ-1吸光度值之差，在标准曲线上查出相应的麦芽糖含量(Mg)，再按下式计算α-淀粉酶的活力(Aα)，淀粉酶活性以每克鲜重所含麦芽糖毫克数(Mg／g·Min)表示：
Aα＝CαVTFW×t×V1（18-1）
Ⅱ-2、Ⅱ-3吸光度平均值与Ⅱ-1吸光度值之差，在标准曲线上查出相应的麦芽糖含量(Mg)，按式18-1计算(α＋β)-淀粉酶的活性AT�
AT＝CT×VTFW×t×V1
式中A:淀粉酶活性，Aα为α-淀粉酶的活性，AT为淀粉酶总活性，主要是α、β-淀粉酶的活性；
Cα:α-淀粉酶水解淀粉生成的麦芽糖量(查标准曲线求值，以下同)；
CT:(α＋β)淀粉酶共同水解淀粉生成的麦芽糖量；
V1:显色所用酶液体积(Ml)；
T:酶作用时间(Min)；
VT:样品稀释液总体积(α-淀粉酶为50Ml，α＋β淀粉酶为500Ml)；
FW:样品鲜重(g)。
【思考题】
1.萌发种子和干种子α-淀粉酶和β-淀粉酶活力有何差异�这种变化有何生物学意义�
2�实验中设置对照的意义何在�
3�α-淀粉酶和β-淀粉酶性质有何不同�作用特点有何不同
㈣ 测定蛋白酶活力时为什么要严格控制反应时间
因为酶活力单位的规定就是，根据酶在最适条件下，单位时间内作用的底物减少量或产物的生成量来规定的。
㈤ 测定酶活力要注意控制哪些条件
（1）酶促反应过程中，要用初速度表示酶促反应速度。
（2）要规定时间、温度、pH等反应条件，并在酶测定过程中保持这些反应条件的恒定。
（3）配制的底物浓度应准确且足够大，底物液中应加入不抑制该酶活力的防腐剂并保存于冰箱中，以防止底物被分解。
（4）标本要新鲜，应保存于冰箱中。用血浆时，应考虑到抗凝剂对酶反应的影响。在采血、分离血清时，应注意防止溶血和白细胞的破裂。
（5）在测定过程中，所用仪器应绝对清洁，不应含有酶的抑制物，如酸、碱及蛋白沉淀剂等。
测定酶活力方法介绍：
终点法：该方式是在特定条件下，将样品中要检知的酶作用一定量的底物，然后根据反应进行到某一程度(即达到某一指标)所需要的时间长短来估计酶的活力。
其一个发展是采用检测器对反应进行连续跟踪，并在反应达到某一程度时，精确地自动记录所需要的时间，这就是酶分析自动化中的固定浓度法；另一个发展是作成简便的酶检测纸片。
动力学法：该方式测定原理是在一定条件下，酶促反应速度和酶浓度成正比，因此测得反应速度就需要求得酶浓度。待测的酶浓度是影响反应速度的唯一因素，其他因素都应处于最适于酶发挥催化作用的水平，为此应选择适宜的底物浓度、缓冲体系、温度，并向反应系统中添加必要的辅助因子。
㈥ 为什么在测酶活时,酪蛋白和酶的反应时间必须精确
保证在酶的稳定反应状况之下获取可比数据。
测酶活力常用其催化某一化学反应的能力来表示。在酶活力测定中酪蛋白和酶的反应时间要控制严格一致，使之均处于线性范围和稳定的初速度之中，以保持两组数据之间稳定的相关性和可比性。
酶活力也称为酶活性，测量酶活力的原因是测定酶催化一定化学反应的能力。酶活力的大小可用在一定条件下，酶催化某一化学反应的速度来表示，酶催化反应速度愈大，酶活力愈高，反之活力愈低。测定酶活力实际就是测定酶促反应的速度。
㈦ 酶活力测定中为什么各样品与底物测定的时间要严格一致
酶活力测定中各样品与底物测定的时间要严格一致，是为了保证在酶的稳定反应状况之下获取可比数据。
酶活力常用其催化某一化学反应的能力来表示。通过作出反应曲线可以用线上任何一点的斜率去表征该时间上的反应速率。在这些酶促反应中，只有初始阶段产物生成量与反应时间呈线性关系。换言之，酶促反应初始速度是不变的。随着时间的延长，斜率逐渐降低曲线上升趋缓，反应速度降低，此时测得的不是真实的酶活力。
另一方面，随着反应时间推移，反应物浓度降低产物浓度增加，它加速了逆反应的进程，并产生对酶的抑制。故测定酶活力应该测定酶促反应的初速率，在其线性范围里进行测定。
所以，在酶活力测定中各样品与底物测定的时间要控制严格一致，使之均处于线性范围和稳定的初速度之中，以保持两组数据之间稳定的相关性和可比性。
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